最近小編經常收到一些技術咨詢：

我們藥品微生物檢驗使用的培養基怎么測定F₀值？

我們在做XLD的培養基滅菌時，采用煮沸當時進行滅菌，這種煮沸滅菌的培養基怎么測定F₀值呢？

生產廠家培養基滅菌的F₀值是怎么規定的呢？

……

下面小編為您詳細解答培養基和F₀值之間的關系。

培養基滅菌是微生物學實驗、制藥生產、食品檢測及臨床診斷中的核心步驟，其質量直接影響實驗結果的準確性、產品的安全性以及數據的可靠性。使用未徹底滅菌的培養基可能造成嚴重的后果，例如在藥品無菌檢查過程中，使用未徹底滅菌的培養基，可能會誤判藥品受到污染，嚴重時會導致批次報廢或召回；其次未徹底滅菌的培養基中含有的某些雜菌可能會競爭營養或分泌某些成分，影響目標微生物的檢出，但一提到滅菌檢驗效果首先想到的就是測定F₀值。

首先了解兩個比較重要的概念: F₀值和過度殺滅程序。

F₀值：即標準滅菌時間，是指滅菌過程賦予被滅菌物品121℃下的等效滅菌時間；

過度殺滅程序 （Overkilled Approach）：一個對產品生物負荷信息要求很低的滅菌程序，即用一個假設的最差的狀況來確定被滅菌品非無菌概率小于10^-6的程序，即要求F₀值均大于12min的程序 [來源于《濕熱滅菌工藝指南》（2008版）]。

歐盟針對液體產品滅菌選擇決策樹（圖1）和《中國藥典》要求，具有不穩定成分的產品使用濕熱滅菌可采用殘存概率法F₀≥8min的程序。過度殺滅法以殺滅微生物作為實現產品無菌的手段，對整個工藝控制要求較低，而F₀≥8min的殘存概率法的工藝，不是依賴最終滅菌法消除微生物污染，需結合生產工藝流程的嚴格控制以保證產品的無菌度。

圖1：歐盟液體產品滅菌選擇決策樹

接下來我們就要知道培養基的滅菌條件與F₀值之間是如何換算的？

如滅菌條件為121℃ 15min，無需進行計算可知其F₀≥15min，該滅菌條件設定屬于進行了過度殺滅程序。如滅菌條件為121℃ 5min，F₀值需要經過測定相應溫度經歷的時間并經過一定換算得到，升降溫階段的貢獻可通過積分L值計入F₀值，如下表所示。

從100℃升溫用時5min，降溫用時5min，保溫5min，通過L值轉換計算該培養基滅菌后F₀值為6.968min，F₀≤8min，未達到殘存概率法中要求的殺滅效果，這種培養基就不能使用了么？ 

最后，我們來解答一下培養基的滅菌效果是否必須用F₀值來評定？

其實大多培養基的滅菌工藝經過計算轉化之后的F₀值都不能滿足≥8min的要求，但是依然可以繼續使用這樣的產品進行微生物檢驗，我們從以下3個方面進行分析：

1、《中國藥典》》<1421 滅菌法>中規定“本通則介紹的常用滅菌方法，可用于制劑、原料、輔料、醫療器械、藥品包裝材料以及設備表面等物品的滅菌，從而使物品殘存或微生物的概率下降至預期水平。”從此概念可以看出上述表格中F₀值主要應用于無菌產品的滅菌保證，而采用煮沸除菌方式滅菌的培養基，為非無菌產品，不用關注F₀值。

2、當培養基用于無菌產品檢測時，必須防止因培養基滅菌不徹底而導致產品出現假陽性結果的發生，此時需要結合培養基的微生物促生長性能和滅菌效果（如關注F₀是否≥8min或生物滅菌指示效果是否通過）同時判定。此時需要結合生物滅菌指示效果、無菌度試驗和微生物促生長性能進行判定。

3、當培養基用于非無菌產品檢測時，如用于供試品的選擇性分離培養（如麥康凱瓊脂培養基）、生化鑒定（如三糖鐵瓊脂培養基）等過程的培養基，只需要保證培養基在培養過程中不引入雜菌干擾，也就是平時說的空白對照結果正常，即可判定其滅菌滿足使用要求。

敲黑板：

1、 針對高壓蒸汽滅菌的培養基應依據其使用范圍確定其是否需要關注F₀值，但一定要保證培養基適用性（含無菌性）和供試品測試的陰性對照合格；

2、 針對煮沸滅菌和過濾除菌的培養基屬于非無菌產品，無需測定F₀值；

3、 高壓蒸汽滅菌過程需定期使用適宜的生物指示劑進行驗證；

4、 無論采用何種方式滅菌的培養基均需用無菌試驗和促生長實驗進行性能驗證。

陸橋公司可提供相應的生物指示劑產品：

參考文獻

1、《中國藥典》（2025年版）

2、國家食品藥品監督管理局藥品認證管理中心 中國制藥設備工程協會 《濕熱滅菌指南》