近期愛爾蘭奶粉污染沙門氏菌的事件鬧的人心惶惶，雖然愛爾蘭政府后來發布公告表示未在任何愛爾蘭配方奶粉生產廠家發現沙門氏菌，但我們也不能忽視對沙門氏菌的檢驗，嬰幼兒的免疫系統較為脆弱，尤其是高度易感嬰兒，比如早產兒、低出生體重嬰兒、免疫缺陷嬰兒等，一旦喂食了被沙門氏菌污染的嬰幼兒配方乳粉，極易被感染致病，出現發燒、腹瀉等腸炎癥狀，嚴重的可能會引發敗血癥，甚至死亡。
下面讓我們溫習一下GB4789.4-2016沙門氏菌的檢驗過程及操作時的注意事項。
預增菌
樣品加入緩沖蛋白胨水（BPW）中進行預增菌，任何樣品均需進行預增菌。有盆友問啦，為什么要用BPW呢？那是因為啊，食品在加工過程中采用加熱、干燥等加工工藝使得細胞存在不同程度的受損，而緩沖蛋白胨水（BPW）呢，作為非選擇性的增菌培養基，較高pH的緩沖體系可以幫助受損的細胞恢復到穩定、活力滿滿的生理狀態，此處也可使用即用型的BPW，因為它操作方便，節省時間。
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選擇性增菌
這里要注意啦，增菌接種前一定要把預增菌后的BPW樣品溶液輕輕搖動混勻，這樣做的原因是有些沙門君是懶得動的（因為有些沙門氏菌沒鞭毛），它們會潛伏在溶液底層，所以我們要把增菌液“搖擺、搖擺”，讓不動的沙門君們在增菌液中都漂浮起來，吸出，分別接入TTB和SC培養基中。
此步驟防止漏檢的方式是采用兩種不同的選擇性增菌液（TTB和SC）進行增菌，是因為沙門君的家族太龐大了，血清型都有2000多種，所以得加強引誘措施，采用不同的培養溫度和不同抑制性的培養基來給不同的沙門君提供安逸的環境來繁衍后代，同時盡量阻攔革蘭氏陽性菌和其他大多數的腸道菌來搗亂，有些細菌還是會趁虛而入的。
下面咱們來說一下TTB和SC使用過程中的注意事項：
TTB培養基：待基礎培養基冷卻至50℃以下時，加入煌綠和碘液，因為培養基中含有不溶解的CaCO3（用來中和吸收有毒性的代謝物質），會有大量的白色沉淀，在分裝時應邊搖勻邊分裝，接種后培養條件為：42℃±1℃培養18h-24h；
SC培養基：千萬不可高壓滅菌，不可過度加熱，最好是現用現配。發現干粉或溶液變紅就不要使用了。培養基開封后建議用封口膜密封后冷藏保存，可延緩培養基變質，接種后培養條件為：36℃±1℃培養18h-24h；
增菌后的TTB與SC
分離
TTB與SC增菌液在接種選擇性分離培養基前，均應輕輕搖動混勻，原因同選擇性增菌一樣，也是為了防止不運動的沙門氏菌漏檢；混勻后，用直徑為3mm的接種環（也就是實驗室用的10μL接種環）將TTB與SC增菌液“分別”劃線接種于兩種選擇性平板，一種是BS瓊脂，為必選的選擇性分離培養基，另外一種選擇性分離培養基是從XLD瓊脂、HE瓊脂、沙門顯色培養基中選擇一個即可；沙門氏菌屬在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征參考下圖：
注意：在一種選擇性瓊脂培養基上不同沙門氏菌會長出不同的菌落形態，在做樣品檢驗時要參考上圖中沙門氏菌的菌落特征，將典型菌落及可疑菌落純化后做生化和血清鑒定，避免漏檢，例如：在XLD瓊脂接菌培養18h-24h時，鼠傷寒沙門氏菌為粉紅色菌落，呈現大的帶光澤的黑色中心，大腸埃希氏菌為黃色菌落，豬霍亂沙門氏菌為淡黃色菌落，比大腸埃希氏菌的顏色略淺，易混淆，為防止漏檢，XLD瓊脂平板上黃色菌落也應做生化和血清鑒定，不可忽視。
下面咱們來說一下選擇性瓊脂培養基使用過程中的注意事項：
BS瓊脂：配制時不可高壓，煮沸滅菌即可，不可反復溶解，避免降低其選擇性；特別需要注意的一點是必須使用前一天配制，且在48h內使用，超過48h也會降低其選擇性，請于室溫暗處貯存，接種后培養條件為：36℃±1℃培養40h-48h；
XLD瓊脂：配制時不可高壓，煮沸滅菌即可，不可反復溶解，避免降低其選擇性，請于室溫暗處貯存；該培養基宜于當天配置，第二天使用，接種后培養條件為：36℃±1℃培養18h-24h；
?HE瓊脂：配制時不可高壓，煮沸滅菌即可，不可反復溶解，避免降低其選擇性；接種后培養條件為：36℃±1℃培養18h-24h；
沙門氏菌顯色培養基：參考陸橋ESM005沙門氏菌顯色培養基（SA）使用說明書。
好啦，咱們今天就先到這吧，關于沙門氏菌的生化和血清試驗操作下篇文章再細細道來。