“牛奶發酵”是產氣莢膜梭菌的重要生化特征之一。我們在操作時會遇到各種問題，導致實驗失敗。下面小編就關于這項實驗和小伙伴們簡單探討一下，希望能為大家解決這一難題。
“牛奶發酵”實驗使用含鐵牛奶培養基。
產氣莢膜梭菌能分解乳糖產酸，使酪蛋白凝固，同時產生大量氣體，將凝固的酪蛋白沖成蜂窩狀，有時可將液面向上推擠，甚至會沖開試管帽，稱為“暴烈發酵”。
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配制
滅菌溫度和時間嚴格按照標簽要求操作，滅菌后迅速冷卻（宜現用現配）。
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接種
取生長旺盛的新鮮FTG培養液1ml，深入培養基底部進行接種。
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培養
46℃±0.5℃水浴培養，水浴培養時確保水面高于培養基液面。
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結果觀察
46℃±0.5℃水浴培養2 h后，每小時觀察一次，觀察至5h。
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結果判斷
5h內不發酵者為陰性，有“暴烈發酵”現象者為陽性。
使用生長旺盛的新鮮菌，是實驗成功的關鍵一步。
FTG培養基培養結果
（左：生長良好；右：空白）
FTG培養基高壓滅菌后若不及時使用，成分中的刃天青可使氧化層由淺黃色變為粉紅色，接種前，觀察培養基氧化層高度不得超過培養基深度的1/3，否則，使用前需要脫氧。
FTG脫氧方法：100℃水浴加熱至粉紅色消失（不超過20分鐘），迅速冷卻，只限加熱一次，并防止被污染。
配制含鐵牛乳培養基時，我們常遇到一些滅菌鍋滅菌完成后，需要等待一段時間才能取出培養基，這時，取出的培養基就已經是凝固的狀態，無法使用。
針對這種情況，小編采取三種方式配制含鐵牛奶培養基，模擬可能遇到的不同情況，并進行了接菌實驗：
●?加熱煮沸至完全溶解，每個試管分裝10mL培養基，115℃滅菌10min，迅速冷卻后待用。
●??加熱煮沸至完全溶解，每個試管分裝10mL培養基，115℃滅菌10min，自然冷卻后待用。（模擬高壓鍋不能及時打開）
●采用煮沸滅菌的方法配置培養基，無菌操作下，試管分裝10mL培養基待用（試管需提前滅菌）。
三種滅菌效果的空白管：
采用煮沸滅菌的培養基和嚴格按照標簽滅菌并迅速冷卻的培養基可獲得正確的實驗結果，若使用已經凝固的培養基進行暴烈發酵實驗，可能導致結果異常。
建議儲存條件為陰涼干燥處，開封后盡量做好密封。在配制培養基時，可以先聞一下培養基的氣味，應是脫脂奶粉的香氣，如有異味，培養基可能已發生變質，不建議使用。
1、GB 4789.13-2012食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 產氣莢膜梭菌檢驗
2、GB 8538-2016 食品安全國家標準 飲用天然礦泉水檢驗方法
3、《中華人民共和國藥典》2020版